Taq полимераза Подобно репликации ДНК в организме, для ПЦР требуется фермент ДНК-полимераза, который создает новые нити ДНК, используя существующие нити в качестве шаблонов. ДНК-полимераза, обычно используемая в ПЦР, называется Taq-полимеразой в честь термоустойчивой бактерии, из которой она была выделена (Thermus aquaticus)..
Почему для ПЦР необходима термостабильная ДНК-полимераза?
aquaticus - это бактерия, обитающая в горячих источниках и гидротермальных жерлах, а Taq-полимераза была идентифицирована как фермент, способный выдерживать условия денатурации белка (высокая температура), необходимые во время ПЦР.
Какая стадия используется в термостабильном ферменте ПЦР?
Термостабильная ДНК-полимераза используется в повторяющихся циклах отжига праймеров, синтеза ДНК и диссоциации дуплексной ДНК в качестве новых матриц. Теоретическая амплификация матричной ДНК, при условии, что реагенты не являются лимитирующими и фермент сохраняет полную активность, составляет 2 , где n - количество циклов.
На каких этапах ПЦР используются ферменты?
Три этапа ПЦР─денатурация, отжиг и удлинение─как показано в первом цикле, и экспоненциальная амплификация ДНК-мишени с повторным циклированием.
Какой фермент используется для амплификации в ПЦР?
ДНК-полимераза Taq обычно используется для амплификации продуктов ПЦР размером 5 кб или меньше. Продукты ПЦР в диапазоне 5–10 т.п.н. могут быть амплифицированы ДНК-полимеразой Taq, но часто требуют большей оптимизации, чем продукты ПЦР меньшего размера.